免疫層析分析技術(shù)快速檢測谷物中的黃曲霉B1

黃qu霉毒素 B1（Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1）是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃qu霉毒素 B1 對(duì)人和若干動(dòng)物具有qiang烈的毒性，其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃qu霉毒素 B1 是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。

本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過單克隆抗體競爭結(jié)合 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗 AFB1 單克隆抗體。

實(shí)驗(yàn)方法：

一、樣品制備

取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩，準(zhǔn)確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中，再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩 5min。4000rpm 離心 1min 得上清液，將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干上清液。根據(jù)樣品的種類按以下規(guī)定的稀釋液量，用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測液。考慮不同樣品對(duì)黃qu霉毒素 B1 的zui

高含量要求，請(qǐng)參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體：

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1. 在進(jìn)行檢測前先完整閱讀使用說明書，使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫；

2. 從原包裝袋中取出試紙卡，打開后平放在桌面上，請(qǐng)?jiān)?1 小時(shí)內(nèi)盡快使用；

3. 用吸管吸取待檢樣品溶液，滴加 3 滴于加樣孔中，加樣后開始計(jì)時(shí)；

4. 結(jié)果應(yīng)在 10min 內(nèi)讀取，超過 12min 的時(shí)間判讀無效。

三、結(jié)果判定

1. 陽性：位置 C 顯示出紅色線條，而位置 T 不顯色時(shí)，或者位置 C 顯示出紅色線條，位置 T 顯示顏色非常模糊時(shí)，判為陽性。陽性結(jié)果表明：AFB1 含量超過樣品允許量。

2. 陰性：位置 C 顯示出紅色線條，位置 T 同時(shí)顯示出紅色線條，且 T 線顏色接近 C 線或者深于 C 線時(shí)，判為陰性。陰性結(jié)果表明：AFB1 含量低于

樣品允許量。

3. 無效：位置 C 不顯示出紅色線條，而位置 T 顯示出紅色線條，該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。